TGF-beta/Smad Signaling

Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb

イイネ!(3)
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2012年2月7日11時30分 現在
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Smad2抗体製品一覧

5339 の推奨プロトコール i

最適な結果を得るために:Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。
推奨プロトコールはCST社内試験の徹底的なバリデーションに基づいて作成されておりますので、正確かつ再現性の高い結果が得られます。

注:各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。

 
用途 (希釈倍率)
ウェスタンブロッティング (1:1,000)、免疫沈降 (1:50)、免疫蛍光細胞染色 (IF-IC) (1:50)、フローサイトメトリー (1:200)、ChIP (1:50)
種交差性
ヒト、マウス、ラット、サル
特異性・感度
内在性レベルのSmad2 タンパク質を検出します。Smad3 タンパク質との交差反応は見られません。
検出タンパク質の分子量
60 kDa
使用抗原
マウスのSmad2 タンパク質のN末端近傍領域 (合成ペプチド)
抗体の由来
ウサギ
貯法
-20℃
社内データ

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from various cell lines using Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb.

Flow Cytometry

Flow Cytometry

Flow cytometric analysis of HeLa cells using Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb (blue) compared to a nonspecific negative control antibody (red).

IF-IC

IF-IC

Confocal immunofluorescent analysis of NIH/3T3 cells, serum-starved (left) or treated with hTGF-β3 #8425 (right), using Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled with DY-554 phalloidin (red).


Chromatin IP

Chromatin IP

Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from 4 x 106 HaCaT cells treated with Human TGF-β3 #8425 (7 ng/ml) for 1 h and either 10 μl of Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339 or 2 μl of Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669, SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.

バックグラウンド

Members of the Smad family of signal transduction molecules are components of a critical intracellular pathway that transmit TGF-β signals from the cell surface into the nucleus. Three distinct classes of Smads have been defined: the receptor-regulated Smads (R-Smads), which include Smad1, 2, 3, 5, and 8; the common-mediator Smad (co-Smad), Smad4; and the antagonistic or inhibitory Smads (I-Smads), Smad6 and 7 (1-5). Activated type I receptors associate with specific R-Smads and phosphorylate them on a conserved carboxy-terminal SSXS motif. The phosphorylated R-Smad dissociates from the receptor and forms a heteromeric complex with the co-Smad (Smad4), allowing translocation of the complex to the nucleus. Once in the nucleus, Smads can target a variety of DNA binding proteins to regulate transcriptional responses (6-8).

  1. Heldin, C.H. et al. (1997) Nature 390, 465-471.
  2. Attisano, L. and Wrana, J.L. (1998) Curr. Opin. Cell Biol. 10, 188-194.
  3. Derynck, R. et al. (1998) Cell 95, 737-740.
  4. Massague, J. (1998) Annu. Rev. Biochem. 67, 753-791.
  5. Whitman, M. (1998) Genes Dev. 12, 2445-2462.
  6. Wu, G. et al. (2000) Science 287, 92-97.
  7. Attisano, L. and Wrana, J.L. (2002) Science 296, 1646-1647.
  8. Moustakas, A. et al. (2001) J. Cell Sci. 114, 4359-4369.
使用例
製品をご使用いただいて研究を発表されましたら、ぜひお知らせください
 
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本製品は試験研究用です。

Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb

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