MAP Kinase Signaling
- MAP Kinase Signaling
PhosphoSitePlus®：
Raf1
- 推奨プロトコール
Phospho-c-Raf (Ser259) Antibody |
イイネ！(0) | 
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| CSTコード | 包装 | 希望納入価格 (円) |
国内在庫  2012年2月9日11時30分 現在 |
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|---|---|---|---|---|
| #9421S | 100 μL | 57,000 | ログインすると国内在庫状況がご確認いただけます。
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| #9421P | 40 μL for Custom Sampler Kit |  Custom Antibody Sampler Kitの構成品を選択できます。 5本以上を選択し、ページ右上のCartから製品確定書を発行してください。 尚、構成品の単品販売は致しておりません。 |
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9421 の推奨プロトコール 最適な結果を得るために：Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。 注：各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。 |
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| 用途（希釈倍率） | |
|---|---|
| ウエスタンブロッティング(1:1,000)、免疫沈降（1:50）、免疫組織染色（パラフィン）（1:50） |
| 種交差性 | |
|---|---|
| ヒト、マウス、ラット、アフリカツメガエル（ニワトリ） |
| 特異性・感度 | |
|---|---|
| 内在性レベルのSer259 がリン酸化されたc-Raf タンパク質を検出します。 |
| 検出タンパク質の分子量 | |
|---|---|
| 74 kDa |
| 使用抗原 | |
|---|---|
| ヒトのc-Raf タンパク質のSer259 周辺領域（合成ペプチド） |
| 抗体の由来 | |
|---|---|
| ウサギ |
| 貯法 | |
|---|---|
| -20℃ |
| ※括弧付きの動物種は配列が100%相同であるため反応すると推定されます。 |
| 社内データ |
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Western Blotting
Site specificity of Phospho-c-Raf (Ser259) Antibody: Western blot analysis of recombinant Myc-tagged c-Raf protein, wild-type (lanes 1 and 3) and S259A mutant (lanes 2 and 4), using Phospho-Raf (Ser259) Antibody or a Myc antibody. (Provided by Dr. Guri Tzivion, Massachusetts General Hospital.)
Western Blotting
Western blot analysis of extracts from HeLa cells, untreated or TPA-treated, using Phospho-c-Raf (Ser259) Antibody (upper), or a total c-Raf antibody (lower).
| バックグラウンド |
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A-Raf, B-Raf and c-Raf (Raf-1) are the main effectors recruited by GTP-bound Ras to activate the MEK-MAP kinase pathway (1). Activation of c-Raf is the best understood and involves phosphorylation at multiple activating sites including Ser338, Tyr341, Thr491, Ser494, Ser497 and Ser499 (2). p21-activated protein kinase (PAK) has been shown to phosphorylate c-Raf at Ser338 and the Src family phosphorylates Tyr341 to induce c-Raf activity (3,4). Ser338 of c-Raf corresponds to similar sites in A-Raf (Ser299) and B-Raf (Ser445), although this site is constitutively phosphorylated in B-Raf (5). Inhibitory 14-3-3 binding sites on c-Raf (Ser259 and Ser621) can be phosphorylated by Akt and AMPK, respectively (6,7). While A-Raf, B-Raf and c-Raf are similar in sequence and function, differential regulation has been observed (8). Of particular interest, B-Raf contains three consensus Akt phosphorylation sites (Ser364, Ser428 and Thr439) and lacks a site equivalent to Tyr341 of c-Raf (8,9). The B-Raf mutation V600E results in elevated kinase activity and is commonly found in malignant melanoma (10). Six residues of c-Raf (Ser29, Ser43, Ser289, Ser296, Ser301 and Ser642) become hyperphosphorylated in a manner consistent with c-Raf inactivation. The hyperphosphorylation of these six sites is dependent on downstream MEK signaling and renders c-Raf unresponsive to subsequent activation events (11).
- Avruch, J. et al. (1994) Trends Biochem. Sci. 19, 279-283.
- Chong, H. et al. (2001) EMBO J. 20, 3716-3727.
- King, A.J. et al. (1998) Nature 396, 180-183.
- Fabian, J.R. et al. (1993) Mol. Cell Biol. 13, 7170-7179.
- Mason, C.S. et al. (1999) EMBO J. 18, 2137-2148.
- Zimmermann, S. and Moelling, K. (1999) Science 286, 1741-1744.
- Sprenkle, A.B. et al. (1997) FEBS Lett. 403, 254-258.
- Marais, R. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 4378-4383.
- Guan, K.L. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275, 27354-27359.
- Davies, H. et al. (2002) Nature 417, 949-954.
- Dougherty, M.K. et al. (2005) Mol. Cell 17, 215-224.
| 使用文献 |
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- Cieslik, K. et al. (2001) Upregulation of endothelial nitric oxide synthase promoter by PI3K{gamma}/Jak2/MEK-1-dependent pathway. J. Biol. Chem. 276, 1211-1219. Applications: Western Blotting
- Weber, S. M. et al. (2002) Inhibition of mitogen-activated protein kinase signaling by chloroquine. J. Immunol. 168, 5303-5309. Applications: Western Blotting
本製品は試験研究用です。