TGF-beta/Smad Signaling
- TGF-beta/Smad Signaling
PhosphoSitePlus®：
Smad3
- 推奨プロトコール
Smad3 (C67H9) Rabbit mAb |
イイネ！(0) | 
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| CSTコード | 包装 | 希望納入価格 (円) |
国内在庫  2012年2月8日17時20分 現在 |
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| #9523S | 100 μL | 46,000 | ログインすると国内在庫状況がご確認いただけます。
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| #9523P | 40 μL for Custom Sampler Kit |  Custom Antibody Sampler Kitの構成品を選択できます。 5本以上を選択し、ページ右上のCartから製品確定書を発行してください。 尚、構成品の単品販売は致しておりません。 |
シグナル伝達研究応援キャンペーン プレゼント *Pサイズのみ
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9523 の推奨プロトコール 最適な結果を得るために：Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。 注：各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。 |
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| 用途 (希釈倍率) | |
|---|---|
| ウェスタンブロッティング (1:1,000)、免疫沈降 (1:100)、免疫蛍光細胞染色 (IF-IC) (1:100)、フローサイトメトリー (1:100)、ChIP (1:50) |
| 種交差性 | |
|---|---|
| ヒト、マウス、ラット、サル、(ウシ、アフリカツメガエル、ゼブラフィッシュ) |
| 特異性・感度 | |
|---|---|
| 内在性レベルのSmad3 タンパク質を検出します。他のファミリータンパク質とは交差しません。 |
| 検出タンパク質の分子量 | |
|---|---|
| 52 kDa |
| 使用抗原 | |
|---|---|
| Smad3 タンパク質のN末端領域 (合成ペプチド) |
| 抗体の由来 | |
|---|---|
| ウサギ |
| 貯法 | |
|---|---|
| -20℃ |
| ※括弧付きの動物種は、配列が100%相同であるため反応すると推定されます。 |
| 社内データ |
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Western Blotting
Western blot analysis of extracts from HT1080 (human), C2C12 (mouse) and B35 (rat) using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb.
Western Blotting
Western blot analysis of extracts from HT1080 cells, treated with TGF-β1, TGFR inhibitor SB-431542 or BMP-2, using Phospho-Smad3 (Ser423/425) (C25A9) Rabbit mAb #9520 (upper) or total Smad3 (C67H9) Rabbit mAb #9523 (lower).
Flow Cytometry
Flow cytometric analysis of HT-1080 cells using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb #9523 (blue) compared to a nonspecific negative control antibody (red).
IF-IC
Confocal immunofluorescent analysis of HT1080 cells, untreated (left) or TGFβ-treated (right), using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled with Alexa Fluor® 555 phalloidin (red).
Chromatin IP
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from 4 x 106 HaCaT cells treated with Human TGF-β3 #3706 (7 ng/ml) for 1 h and either 10 μl of Smad3 (C67H9) Rabbit mAb or 2 μl of Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669, SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.
| バックグラウンド |
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Members of the Smad family of signal transduction molecules are components of a critical intracellular pathway that transmit TGF-β signals from the cell surface into the nucleus. Three distinct classes of Smads have been defined: the receptor-regulated Smads (R-Smads), which include Smad1, 2, 3, 5, and 8; the common-mediator Smad (co-Smad), Smad4; and the antagonistic or inhibitory Smads (I-Smads), Smad6 and 7 (1-5). Activated type I receptors associate with specific R-Smads and phosphorylate them on a conserved carboxy-terminal SSXS motif. The phosphorylated R-Smad dissociates from the receptor and forms a heteromeric complex with the co-Smad (Smad4), allowing translocation of the complex to the nucleus. Once in the nucleus, Smads can target a variety of DNA binding proteins to regulate transcriptional responses (6-8).
Following stimulation by TGF-β, Smad2 and Smad3 become phosphorylated at their carboxyl termini (Ser465 and 467 on Smad2; Ser423 and 425 on Smad3) by TGF-β Receptor I. Phosphorylated Smad 2/3 can complex with Smad4, translocate to the nucleus and regulate gene expression (9-11).
- Heldin, C.H. et al. (1997) Nature 390, 465-471.
- Attisano, L. and Wrana, J.L. (1998) Curr. Opin. Cell Biol. 10, 188-194.
- Derynck, R. et al. (1998) Cell 95, 737-740.
- Massague, J. (1998) Annu. Rev. Biochem. 67, 753-791.
- Whitman, M. (1998) Genes Dev. 12, 2445-2462.
- Wu, G. et al. (2000) Science 287, 92-97.
- Attisano, L. and Wrana, J.L. (2002) Science 296, 1646-1647.
- Moustakas, A. et al. (2001) J. Cell Sci. 114, 4359-4369.
- Abdollah, S. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 27678-27685.
- Souchelnytskyi, S. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 28107-28115.
- Liu, X. et al. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 10669-10674.
| 使用文献 |
|---|
- Li, Q. et al. (2008) Mol Cell Biol 28, 7001-11. Applications: Western Blotting
- Louafi, F. et al. (2010) J Biol Chem 285, 41328-36. Applications: Western Blotting
本製品は試験研究用です。