PhosphoPlus^® In-Cell Duets

• In-Cell Western Product Line
• プロトコール

PhosphoPlus^® In-Cell Duet (ICW Compatible) は、LI-COR^® Biosciences Odyssey^® Infrared Imaging Systemのような近赤外線検出機能を持つマルチウェルプレートスキャナーを用い、ホールセルアッセイでタンパク質の活性化状態を簡便に評価できるキットです。標的タンパク質の活性化特異的抗体とTotal抗体が含まれており、リン酸化タンパク質のレベルを個別に測定でき、そのレベルを総タンパク質濃度で標準化できます。優れた性能を有し、マルチプレックスアッセイフォーマットで検証した抗体で構成しました。近赤外線検出カクテルも同梱されています。

• 活性化状態のタンパク質に特異的なCSTの最高品質のXP^®抗体と、それに最適なTotal抗体を組み合わせていますので、最良の実験結果が得られます。
• カクテルは事前に最適化の上、社内試験でリン酸化とTotal抗体の結合に支障がないことを確認しており、時間と試薬を節約できます。
• 製品を熟知している製品開発者による、迅速かつ的確な技術的サポートを提供いたします。

Analysis of MDA-MB-468 cells exposed to varying concentrations of LY294002 (PI3 Kinase Inhibitor) #9901 for 2 hours, followed by hEGF #8916 stimulation for 20 minutes. The phosphorylation status of Akt, as well as the total protein expression level, was measured simultaneously using the PhosphoPlus^® Akt (Ser473) In-Cell Duet (ICW Compatible) #7255. With increasing concentrations of LY294002, a significant decrease (~3-fold) in phospho-Akt signal as compared to the hEGF-stimulated control was observed, while total Akt protein levels remained the same and were used to normalize the data. When using phospho-Akt as a measurement, the IC₅₀ of this compound was 2.7 μM. Data and images were generated on the LI-COR^® Biosciences Odyssey^® Infrared Imaging System.

PhosphoPlus^® In-Cell Duets (ICW Compatible)

Applications Key: ICW=In-Cell Western 
Reactivity Key: H=Human  M=Mouse  R=Rat  Mk=Monkey