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#13038 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb

 
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2017年10月20日19時0分 現在
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#13038S100 μL71,000
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Akt 製品一覧

感度分子量 (kDa)抗体の由来貯法
内在性60Rabbit-20℃
種交差性 (社内試験済)
交差する可能性がある種 i

社内試験はしていませんが、配列が100%相同であるため反応すると推定される種

ヒト、マウス、ラット、サル -
13038 の推奨プロトコール i

最適な結果を得るために:Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。
推奨プロトコールはCST社内試験の徹底的なバリデーションに基づいて作成されておりますので、正確かつ再現性の高い結果が得られます。

注:各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。

 

ウェスタンブロッティング (1:1000)免疫沈降 (1:50)免疫蛍光細胞染色 (IF-IC) (1:1600)フローサイトメトリー (1:6400)

CST推奨プロトコールに欠かせない関連製品

特異性・感度
内在性レベルのThr308 がリン酸化されたAkt1 タンパク質を検出します。また、内在性レベルのThr309 がリン酸化されたAkt2 タンパク質、あるいはThr305 がリン酸化されたAkt3 タンパク質も検出します。
使用抗原
ヒトのAkt1 タンパク質のThr308 周辺領域 (合成ペプチド)

ホモロジー (相同性) 検索をご希望の場合 >>>

ホモロジー検索をご要望の際は、ご希望のサンプル種のアミノ酸配列とともにお問合せください。

社内データ

※下記の社内データは、すべて13038 の推奨プロトコールで実験した結果です。

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from NIH/3T3 cells, untreated (-) or treated with Human Platelet-Derived Growth Factor AA (hPDGF-AA) #8913 (100 ng/ml, 5 min; +), and untreated (-) LNCaP and PC-3 cells, using Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (upper) or Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691 (lower).

IP

IP

Immunoprecipitation of phospho-Akt (Thr308) from Jurkat cell extracts using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot analysis was performed using Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb.

IF-IC

IF-IC

Confocal immunofluorescent analysis of C2C12 cells, insulin-treated (100 nM, 15 min; left) or treated with LY294002 #9901 (50 μM, 2 hr; right), using Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with DY-554 phalloidin (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).


Flow Cytometry

Flow Cytometry

Flow cytometric analysis of serum-starved NIH/3T3 cells, untreated (blue) or treated with Human Platelet-Derived Growth Factor AA (hPDGF-AA) #8913 (100 ng/ml, 15 min; green), using Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 was used as a secondary antibody.

バックグラウンド

Akt, also referred to as PKB or Rac, plays a critical role in controlling survival and apoptosis (1-3). This protein kinase is activated by insulin and various growth and survival factors to function in a wortmannin-sensitive pathway involving PI3 kinase (2,3). Akt is activated by phospholipid binding and activation loop phosphorylation at Thr308 by PDK1 (4) and by phosphorylation within the carboxy terminus at Ser473. The previously elusive PDK2 responsible for phosphorylation of Akt at Ser473 has been identified as mammalian target of rapamycin (mTOR) in a rapamycin-insensitive complex with rictor and Sin1 (5,6). Akt promotes cell survival by inhibiting apoptosis through phosphorylation and inactivation of several targets, including Bad (7), forkhead transcription factors (8), c-Raf (9), and caspase-9. PTEN phosphatase is a major negative regulator of the PI3 kinase/Akt signaling pathway (10). LY294002 is a specific PI3 kinase inhibitor (11). Another essential Akt function is the regulation of glycogen synthesis through phosphorylation and inactivation of GSK-3α and β (12,13). Akt may also play a role in insulin stimulation of glucose transport (12). In addition to its role in survival and glycogen synthesis, Akt is involved in cell cycle regulation by preventing GSK-3β-mediated phosphorylation and degradation of cyclin D1 (14) and by negatively regulating the cyclin dependent kinase inhibitors p27 Kip1 (15) and p21 Waf1/Cip1 (16). Akt also plays a critical role in cell growth by directly phosphorylating mTOR in a rapamycin-sensitive complex containing raptor (17). More importantly, Akt phosphorylates and inactivates tuberin (TSC2), an inhibitor of mTOR within the mTOR-raptor complex (18,19).

使用例
 
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DRAQ5 is a registered trademark of Biostatus Limited.
Tween is a registered trademark of ICI Americas, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

本製品は試験研究用です。

Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb

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