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免疫蛍光染色 テクニカルサポート

最良の結果を得るために、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。

推奨プロトコールは社内試験の徹底的なバリデーションに基づいて作成され、各製品の性能を最大限引き出すことができます。
また、正確かつ再現性の高い結果が得られます。

同じアプリケーションでも製品により推奨プロトコールが異なることがございます。
各製品専用の推奨プロトコールは、必ず製品ページの推奨プロトコール欄よりご確認ください。


製品専用の推奨プロトコール検索    検索

免疫蛍光染色に関する技術的お問合せの際は、下記テクニカルサポートフォームをご利用ください。
より良いサポートを迅速にご提供するために、できる限り詳細な実験プロトコールをご記入くださいますようお願いいたします。

※は必須項目です。

一次抗体について

  1. コード番号:  (例) 4060
  2. バイアル記載のLot No.:  (例) 1
  3. バイアル記載のReference Date:  (例) 07/2008
  4. 購入日と購入代理店:  (例) 07/2008 ⚪︎⚪︎株式会社
  5. 保存温度:    
  6. 小分け保存しましたか?:  

標本について

  1. 種類:      
  2. :      
  3. 臓器または細胞名:  (例) 脳、Jurkat
  4. 固定前の細胞/組織の処理方法:  (例) 5 mM EGF; 1, 3, 5 min
  5. ポジディブコントロール:  (例) Jurkat (Calyculin A処理)
  6. ネガティブコントロール:    
  7. 固定方法 (浸水、灌流) :    
  8. 固定液:  (例) 4% Formaldehyde
  9. インキュベーション温度と時間:  (例) 4℃/ 15 min
  10. 透過化処理の有無:  
  11. 透過化処理の条件:  (例) 0.1% Triton X-100/ RT/ 5 min
  12. 細胞を使用した場合、細胞の処理後から固定までにどれくらい時間がかかりましたか?:  (例) 直ぐに固定
  13. 切片作製/固定から染色までにどれくらい時間がかかりましたか?:  (例) 1 hr
  14. 未染色の切片の保存方法と保存期間:  (例) -20℃, 10 days
  15. 使用した細胞/組織にターゲットタンパク質があることを他の方法で確認しましたか?:  
  16. リン酸化抗体を使用した場合、サンプル処理のプロトコールがターゲットタンパク質のリン酸化に作用することを確認していますか (文献、あるいは他のアプリケーションで実証済み) ?:  (例) はい:PMID 000000

染色プロトコールについて

  1. 抗原賦活化の手順 (パラフィン切片の場合):  (例) クエン酸 pH 6.0、電子レンジ、95℃、10 min
  2. ブロッキングの手順:  (例) 5% Normal goat serum/ 1 hr
  3. 過酸化水素処理 (パラフィン切片の場合):  
  4. 一次抗体の希釈率:  (例) 1:200
  5. ネガティブコントロールにアイソタイプコントロールを使用した場合、その抗体濃度  (例) 100 μg/mL
  6. 一次抗体希釈バッファーの組成 (界面活性剤を含む) :  (例) 1% BSA/ 0.3% Triton X-100/ PBS
  7. 一次抗体の反応時間と反応温度:  (例) 4℃/ 一晩
  8. 同じスライドで他の一次抗体を使用した場合は、その抗体について教えてください。: 
  9. 洗浄バッファーの組成:  (例) PBS
  10. 一次抗体反応後の洗浄時間と回数:  (例) 5 min×3
  11. 二次抗体のメーカー名と製品コード:  (例) CST, #4414
  12. 二次抗体の希釈率:  (例) 1:200
  13. 二次抗体希釈バッファーの組成 (界面活性剤を含む) :  (例) 1% BSA/ 0.3% Triton X-100/ PBS
  14. 二次抗体の反応時間と反応温度:  (例) 室温/ 1 hr
  15. 二次抗体反応後の洗浄時間と回数:  (例) 5 min×3
  16. 封入剤:  (例) ProLong® Gold Antifade Reagent

サンプル観察について

  1. 顕微鏡/イメージングシステムのタイプ: 
  2. 励起光源 (固有レーザー、水銀球、など) : 
  3. 問題点: 詳細をご記入ください。 実験データの添付も可能です。

添付ファイル  (5MBまで)

*ファイル名は英数字にしてください

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